胎牛血清（Fetal Bovine Serum，F(xiàn)BS）是在生物醫(yī)學(xué)研究和細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛使用的重要生物制品，它含有豐富的生長(zhǎng)因子、蛋白質(zhì)和其他生物分子，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖起著至關(guān)重要的作用。制備胎牛血清是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，通常由專業(yè)的生物制品公司進(jìn)行，以確保其質(zhì)量和純度。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時(shí)，將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比，胎牛血清顯然產(chǎn)量低，成本高。
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質(zhì)最高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少。
一、胎牛血清性能：
1、性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。
2、蛋白質(zhì)含量 3.5%～5.0%（ w/v）
3、血紅蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）
4、無(wú)菌檢驗(yàn) 陰性
5、支原體檢驗(yàn) 陰性
6、細(xì)菌內(nèi)毒素 ≤5（EU/ml）
7、牛腹瀉病毒 陰性
8、大腸桿菌噬菌體 陰性
9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長(zhǎng)曲線（接種濃度）最大增殖濃度≥2.5×106個(gè)/ml
細(xì)胞倍增時(shí)間 ≤15h
克隆率 ≥85%
二、血清的優(yōu)劣好壞分辨
現(xiàn)在市場(chǎng)上的胎牛血清種類(lèi)，很多人分辨血清的優(yōu)劣好壞很困難。在這里總結(jié)了以下幾點(diǎn)：
1、看顏色
??根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl，實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響，這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血。
??國(guó)產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散，大多是由屠戶采血后馬上離心收集，所以很少會(huì)有溶血，表現(xiàn)出明亮的蠟黃色，當(dāng)然，國(guó)產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。
??進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血，因?yàn)檎嬲奶ヅＱ迥δ懿睿t細(xì)胞容易破裂。
??總的來(lái)說(shuō)，國(guó)產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清，質(zhì)量的呈現(xiàn)出談黃、微紅色，如Gibco 16000，差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然，熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难澹捎谘t蛋白的破壞氧化，會(huì)呈現(xiàn)出暗紅，甚至咖啡色。
2、看澄清度
??進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡，而國(guó)產(chǎn)血清，因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清，相對(duì)而言加粘稠，顏色略深，這對(duì)于初步接觸血清的人很難判斷，但把兩者進(jìn)行對(duì)比，可容易分辨。
3、看沉淀
??很多血清客戶，會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀，從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題，這是沒(méi)有根據(jù)的。
??血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響，沉淀的產(chǎn)生原因很多，和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。
??國(guó)產(chǎn)的血清，從采血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會(huì)經(jīng)過(guò)多次凍融，每次凍融過(guò)程，就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀，這樣，血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而加的“干凈”，很少有沉淀產(chǎn)生。
??進(jìn)口的胎牛血清，過(guò)濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融，生產(chǎn)后的成品也是清澈的，但隨著時(shí)間的推移，血清中的大量纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀。當(dāng)然，進(jìn)口的新生牛血清，一般牛齡都在2周左右，血清中的各種蛋白含量明顯偏高，生產(chǎn)后血清可能會(huì)渾濁，甚至有大量沉淀。
??當(dāng)然，購(gòu)買(mǎi)回來(lái)的血清都是冰凍狀態(tài)，使用時(shí)需要融化，融化過(guò)程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行，否則沉淀相對(duì)較多，雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量，但對(duì)細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。
三、胎牛血清制備過(guò)程的主要步驟：
1、采集胎牛血液
制備胎牛血清的第一步是采集胎牛的血液。這需要在專業(yè)場(chǎng)所進(jìn)行，確保采集的胎牛來(lái)自健康且受監(jiān)控的牧場(chǎng)。采集血液需要遵循倫理和動(dòng)物福利的法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)。確保供體是5-8月齡的牛胚胎。
2、血液分離
采集的胎牛血液會(huì)經(jīng)過(guò)離心分離，將血漿與血細(xì)胞分開(kāi)。血漿中包含了胎牛血清的大部分有利于細(xì)胞體外生長(zhǎng)和繁殖的營(yíng)養(yǎng)成分，如蛋白質(zhì)、生長(zhǎng)因子和激素。
3、過(guò)濾和清理
分離后的血漿會(huì)經(jīng)過(guò)過(guò)濾等步驟，以去除殘留的細(xì)胞碎片和顆粒物。這有助于提高血清的質(zhì)量和純度，確保它不含有微生物或其他污染物。
4、滅菌
胎牛血清需要進(jìn)行滅菌處理，以確保其中不含有微生物污染。常見(jiàn)的滅菌方法包括過(guò)濾、輻照（細(xì)胞治療專用）等，這些方法可以有效地殺滅細(xì)菌、病毒和其他微生物。
以Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清為例：將經(jīng)過(guò)初步檢測(cè)合格的很多供體胎牛的粗血清，混合在一起，在低溫條件下，經(jīng)七次加壓過(guò)濾，最后三次為0.1 μm無(wú)菌過(guò)濾處理，得到淺黃色，澄清，稍粘稠液體。同一批次血清質(zhì)量上基本無(wú)差異。不同廠家一個(gè)批次產(chǎn)量差異較大，從100升到2000升不等。批次大，更利于試驗(yàn)的穩(wěn)定和連續(xù)的可參照性。
5、質(zhì)量控制
制備后的胎牛血清通常會(huì)經(jīng)過(guò)一系列的質(zhì)量控制測(cè)試，包括檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的兼容性、生長(zhǎng)因子和激素水平，以確保其質(zhì)量符合要求。這些測(cè)試有助于驗(yàn)證血清的質(zhì)量和生物活性。
6、分裝和儲(chǔ)存
制備后的胎牛血清會(huì)被分裝到小瓶或小管中，并嚴(yán)格冷凍保存。這有助于防止血清中的成分降解或受到污染。儲(chǔ)存溫度通常為零下20攝氏度或更低，以確保血清的長(zhǎng)期保存穩(wěn)定性。
總之，制備胎牛血清是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，需要專業(yè)的設(shè)備和技術(shù)。在實(shí)驗(yàn)室中，研究人員通常會(huì)從可靠的商業(yè)供應(yīng)商購(gòu)買(mǎi)胎牛血清，這些供應(yīng)商生產(chǎn)的胎牛血清符合嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，可以用于細(xì)胞培養(yǎng)和生物醫(yī)學(xué)研究。正確使用和存儲(chǔ)胎牛血清是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵，因此研究人員應(yīng)遵循供應(yīng)商的建議和操作規(guī)程，以充分利用這一重要的生物制品。
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