單克隆抗體(Monoclonal Antibodies,簡稱mAb)是一種由單一的B淋巴細胞克隆所產(chǎn)生的抗體。與傳統(tǒng)的多克隆抗體相比,單克隆抗體具有高度的特異性和親和力,因此在診斷和治療領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用前景。
一、單克隆抗體的優(yōu)缺點:
1.單克隆抗體的優(yōu)點:
(1)雜交瘤可以在體外“永久”地存活并傳代,只要不發(fā)生細胞株的基因突變,就可以不斷地生產(chǎn)高特異性、高均一性的抗體。
(2)可以用相對不純的抗原,獲得大量高度特異的、均一的抗體。
(3)由于可能得到“無限量”的均一性抗體,所以適用于以標記抗體為特點的免疫學(xué)分析方法,如IRMA和ELISA等。
(4)由于單克隆抗體的高特異性和單一生物學(xué)功能,可用于體內(nèi)的放射免疫顯像和免疫導(dǎo)向治療。
2.單克隆抗體的缺點:
(1)單克隆抗體固有的親和性和局限的生物活性限制了它的應(yīng)用范圍。由于單克隆抗體不能進行沉淀和凝集反應(yīng),所以很多檢測方法不能用單克隆抗體完成。
(2)單克隆抗體的反應(yīng)強度不如多克隆抗體。
(3)制備技術(shù)復(fù)雜,而且費時費工,所以單克隆抗體的價格也較高。
二、制備步驟:
單克隆抗體的制備主要分為三個步驟:
1、免疫原的選擇和制備;
2、混合和篩選;
3、克隆和擴增。
第一步驟中,需要選擇適宜的免疫原。一般情況下,免疫原可由蛋白質(zhì)、肽或藥物等構(gòu)成。免疫原通常會注射到小鼠或其他哺乳動物中,以激發(fā)其免疫反應(yīng)產(chǎn)生抗體。
第二步驟中,需要從免疫動物的脾臟或其他淋巴組織中獲取B淋巴細胞,然后將其與腫瘤細胞融合生成雜交瘤細胞。雜交瘤細胞具有不斷分裂并維持特異性抗體合成的能力。
第三步驟中,需要從雜交瘤細胞群體中篩選并挑選出產(chǎn)生目標單克隆抗體的正常雜交瘤細胞,并將其擴增。