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產(chǎn)品名稱
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15min高產(chǎn)全血基因組DNA提取試劑盒
50T
A-PJ1167
描述:該試劑盒采用獨特的裂解液,可快速可靠的從抗凝全血樣本中純化出高純度的基因組 DNA,最大限度的去除蛋白、色素、脂類等雜質污染。應用本試劑盒獲取的 DNA純度高,無抑制劑,A260/A280 為 1.6-1.9。應用本試劑盒提取的 DNA 可直接用于限制性酶切反應、PCR、文庫構建、Southern 雜交等多種分子生物學實驗。 注意事項: (1) 本試劑盒中的 Washing Buffer 中已經(jīng)加乙醇,無需單獨添加。 (2)gDNA LB1,儲存時可能會有白色結晶沉淀,放置于56℃水浴鍋溶解后,不影響使用效果。 (3)蛋白酶 K(20 mg/ml)長期保存請儲存于-20℃,短期室溫保存(6 個月),其它組分儲存于室溫。 (4)該試劑盒的保質期為 2 年。 操作方法 (1)樣本處理(1.5 或 2 ml EP 管中處理)人抗凝全血:吸取 0.2~0.8 ml 抗凝全血加入到 800 μl 紅細胞裂解液中上下顛倒混合均勻,13000rpm 離心 30s,去上清,留白細胞沉淀,用 50 μl 水重懸白細胞沉淀(有少量紅細胞殘留并不影響 DNA 的產(chǎn)量,如仍然有大量紅細胞未裂解,可再次用紅細胞裂解液將紅細胞裂解)。淋巴細胞分離液分離出的白細胞:直接吸取 50~80 μl 白細胞。有核紅細胞抗凝全血(禽血):吸取 10 μl 抗凝全血加入到50 μl 無菌水中,漩渦震蕩混合均勻。 (2)向上述準備好的樣品溶液中加入 100 μl gDNA LB1 和20 μl 蛋白酶 K 漩渦混合均勻 10s,56℃水浴鍋中消化5~30min(長時間消化可提高 DNA 的產(chǎn)量)。 (3)加入 700 μl gDNA BB2 漩渦震蕩混合均勻 1min,肉眼觀察有無未溶解的血凝塊,如果無血凝塊,則直接倒入到吸附柱中,13000rpm 離心 1min。注意:如果有未溶解的血凝塊,則短離心去除血凝塊后,再倒入到吸附柱中,進行后續(xù)離心操作。 (5)倒掉廢液,向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer,13000rpm 離心 15s。重復此步驟一次。 (6)將吸附柱重新放回離心機,13000rpm 空離心 2min,將殘留的乙醇徹底甩干。 (7)將吸附柱芯放入到 1.5ml 收集管中,向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer(DNA Elution Buffer 預熱到 65℃將提高洗脫產(chǎn)量),室溫放置 1min,13,000rpm 離心1min,洗脫液即為基因組 DNA,冷凍保存。
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客服-林燕