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pET-32a(+) Seamless Cloning Kit(線性化質(zhì)粒)
A-Hc2228
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A-Hc2228-20 μl 20 μl 20 μl ¥1560.00 登錄查看
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 pET-32a(+) Seamless Cloning Kit(線性化質(zhì)粒

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A-Hc2228

產(chǎn)品介紹:
pET-32a(+)載體為高水平的原核表達載體,在N端含有TrxA(Trx-tag,硫氧還蛋白標簽)有利于蛋白的可溶性表達。pET-32a(+)在N端還含有His-Tag, Thrombin(凝血酶)酶切位點,S-Tag,Enterokinase(腸激酶)酶切位點,在C端具有His-Tag。本產(chǎn)品提供pET-32a(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體,可用無縫克隆技術(shù)將單個或多個DNA片段組裝到載體上。
無縫克隆技術(shù)可在重組酶的作用下,只需一步反應(yīng),便可將片段克隆到任何載體中的任意位置,得到重組質(zhì)粒。無縫克隆技術(shù)作為一種非常強大的克隆技術(shù),具有快速、簡便、高效、多片段組裝和定向克隆等特點,用于單個DNA片段的克隆,多個DNA片段組裝克隆以及多位點突變構(gòu)建等實驗?zāi)康摹?br> 產(chǎn)品特點:
1. pET-32a(+)載體為原核表達載體,具有N-TrxA, N-His,N-Thrombin, N-S,N-Enterokinase和C-His。
2. pET-32a(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體,省時省力。
3. 無縫克隆技術(shù)只需要簡單的 PCR 擴增就可以制備片段DNA。
4. 可以克隆長片段和多片段DNA。
5. 簡單、快速、精確、定向克隆。
操作步驟:
1. pET-32a(+)線性化載體使用方法:
(1) pET-32a(+)線性化載體當(dāng)做克隆載體使用,可以在擴增PCR產(chǎn)物的
上游引物 5’端添加序列:GTACCGACGACGACGACAAGGCCATG
下游引物 5’端添加序列:CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAG
通過無縫克隆連接到pET-32a(+)中。
(2) 測序引物
PET-32A-SEQR: 5'-CTGGTTCTGGCCATATGCAC-3'
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
(3) pET-32a(+)線性化載體為 EcoRⅠ酶切后的線性化載體

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