植物硝態(tài)氮試劑盒說明書
微量法100T/96S
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
硝態(tài)氮是植物最主要的氮源。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況，可作為土壤氮肥的指標。測定植物體內(nèi)的硝態(tài)氮含量，不僅能夠反映出植物的氮素營養(yǎng)情況，而且對鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質(zhì)也有重要的意義。
測定原理
在濃酸條件下，NO3-與水楊酸反應(yīng)，生成硝基水楊酸，硝基水楊酸在堿性條件下（PH>12）呈黃色，在一定范圍內(nèi)，其顏色深淺與含量成正比，可比色測定計算得硝態(tài)氮含量。
自備實驗用品及儀器
蒸餾水、天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制
試劑一：粉劑×2支，4℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加1.2mL濃硫酸充分溶解。
試劑二：液體60mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1支，4℃保存。
樣本處理
按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，室溫勻漿后置于90℃恒溫水浴鍋中浸提30min，期間不斷晃動或者置于90℃恒溫搖床中振蕩提取30min，待冷卻后于25℃，12000g離心15min，取上清待測。（深色植物勻漿后加入約3mg試劑三后再提?。?/p>
測定操作表
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空白管 |
測定管 |
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樣本（μL） |
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10 |
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蒸餾水（μL） |
10 |
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試劑一（μL） |
20 |
20 |
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充分混勻，25℃靜置30min |
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試劑二（μL） |
475 |
475 |
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混勻，渦旋振蕩，使出現(xiàn)的沉淀充分溶解，轉(zhuǎn)移200uL至微量石英比色皿/96孔板中測定410nm處吸光值A(chǔ)，△A=A測定管-A空白管 |
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注意：空白管只需測定一次。
計算公式
標準曲線：y=0.0156x+0.0073，R2=0.9997
NO3—— N含量（mg/kg鮮重）=（△A-0.0073）÷ 0.0156÷（W÷V樣總）
=64.1×（△A-0.0073）÷W
V樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，g
標準曲線：y=0.0078x+0.0073，R2=0.9997
NO3—— N（mg/kg鮮重）=（△A-0.0073）÷ 0.0078÷（W÷V樣總）
=128.2×（△A-0.0073）÷W
V樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，g
注意事項
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資料/datasheet
