聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)產(chǎn)物是指通過(guò)特定的引物和酶在模板DNA上進(jìn)行擴(kuò)增的DNA片段。這種產(chǎn)物是特定的DNA序列的拷貝,通常由一對(duì)引物指導(dǎo)DNA聚合酶沿模板DNA合成。具有廣泛的生物學(xué)應(yīng)用價(jià)值,且其純化和分析需要考慮多種因素以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。
目前主流的實(shí)時(shí)熒光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)方法分為染料法和探針?lè)?/span>,染料法以SYBRGreen法為代表,SYBRGreen染料游離時(shí)熒光微弱,但但一旦與雙鏈DNA結(jié)合后,熒光大大增強(qiáng),反應(yīng)管中的熒光強(qiáng)度與反應(yīng)管中雙鏈DNA的數(shù)量成正比例關(guān)系,因此熒光定量pcr實(shí)驗(yàn)步驟可以通過(guò)檢測(cè)熒光計(jì)算反應(yīng)管中產(chǎn)生的雙鏈DNA(PCR產(chǎn)物)的量,但該方法沒(méi)有特異性,非特異性擴(kuò)增的產(chǎn)物也會(huì)被計(jì)入。
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