果糖（fructose ，F(xiàn)T）含量試劑盒說明書
微量法 100管/96樣
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
果糖是一種最為常見的己酮糖，是葡萄糖的同分異構(gòu)體，以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中，能與葡萄糖結(jié)合生成蔗糖。果糖是最甜的單糖，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、保健品生產(chǎn)中。
測定原理：
果糖與間苯二酚反應(yīng)，生成有色物質(zhì)，在480nm下有特征吸收峰。
所需的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100ml×1瓶，4℃保存；
試劑一：1mg/mL標(biāo)準(zhǔn)液10mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體 25ml×1瓶，4℃保存；
試劑三：液體 8ml×1瓶， 4℃避光保存；
試劑四：粉劑0.5g×1瓶，常溫保存。
果糖提取：
稱取0.1~0.2g樣本，常溫研碎；加入0.5mL提取液，適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中；置于80℃水浴鍋中10min（蓋緊，以防止水分散失），振蕩3~5次，冷卻后，4000g，25℃離心10min，取上清；加入少量（約2mg）試劑四，80℃脫色30min（蓋緊，以防止水分散失）；再加入0.5mL提取液，4000g，25℃離心10min，取上清液測定。
測定步驟
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試劑（μL） |
空白管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
測定管 |
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樣本 |
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30 |
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試劑一 |
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30 |
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蒸餾水 |
30 |
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試劑二 |
210 |
210 |
210 |
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試劑三 |
60 |
60 |
60 |
混勻，95℃水浴反應(yīng)30min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后取200μL至微量石英比色皿或96孔板中測定480nm處光吸收值，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測定管分別記為A1、A2和A3。空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只要做一管。
果糖含量計算：
1、果糖含量(mg/mg prot）=（C標(biāo)準(zhǔn)管×V1）×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷（A2-A1) ÷Cpr
此法需要自行測定蛋白濃度。
2、果糖含量(mg/g鮮重)=(C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。
C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1mg/mL；V1：加入樣本體積，0.03mL；V2：加入提取液體積，1mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。
注意：最低檢測限為100ng/g鮮重或1ng/mg prot
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資料/datasheet
