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土壤木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（SLiP）測(cè)試盒（比色法）
AS6321306
貨號(hào) 純度 規(guī)格 目錄價(jià) 會(huì)員價(jià) 庫(kù)存 數(shù)量 購(gòu)買(mǎi)
AS6321306-100管/48樣 100管/48樣 ￥980.00 登錄查看
AS6321306-50管/24樣 50管/24樣 ￥500.00 登錄查看
產(chǎn)品詳情

土壤木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（Soil lignin peroxidase，S-Lip）試劑盒說(shuō)明書(shū)

微量法100T/48S

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

木質(zhì)素過(guò)氧化物酶（EC1.11.1.14）是一種含亞鐵血紅素的過(guò)氧化物酶，屬于木質(zhì)素降解酶系，在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力。

測(cè)定原理

木質(zhì)素過(guò)氧化物酶氧化藜蘆醇生成藜蘆醛，在310nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。

試劑組成和配制    

試劑一：液體25mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體15mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體10mL×1瓶，4℃保存。                     

樣品處理

新鮮土樣風(fēng)干，過(guò)30-50目篩。

測(cè)定操作

 

對(duì)照管

測(cè)定管

土樣（g）

0.04

0.04

甲苯（μL）

30

30

25℃靜置15min

試劑一（μL）

 

200

蒸餾水（μL）

200

 

試劑二（μL）

120

120

試劑三（μL）

80

80

30℃震蕩反應(yīng)3h，冰浴5min，12000g，4℃離心10min，取上清200μL，于微量石英比色皿/96孔板(UV)板，測(cè)定310nm處吸光值，分別記為A對(duì)照和A測(cè)定，△A=A測(cè)定- A對(duì)照

酶活計(jì)算公式

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

酶活性定義：每克土壤每天氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

S-LiP活性（nmol/d /g 土樣）= ×V反總÷W÷T= 344×△A÷W

ε：藜蘆醛摩爾消光系數(shù)：9300L/mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.4mL； W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，3h

  1. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

酶活性定義：每克土壤每天氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。

S-LiP活性（nmol/d /g 土樣）= ×V反總÷W÷T= 688×△A÷W

ε：藜蘆醛摩爾消光系數(shù)：9300L/mol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.4mL； W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，3h

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