注
意：正式測定前務必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定
產(chǎn)品簡介：
果膠甲酯化程度(PMD)決定了負電荷數(shù)量，這與植物根系細胞壁吸附重金屬，抵御重金屬毒害密切相
關。細胞壁果膠含量和甲酯化程度影響著植物細胞壁對重金屬毒害的抵御能力。
果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇，甲醇在醇氧化酶作用下生成甲醛，接著與 2,4-戊二酮反應顯色，
該有色物質在 412nm 下有特定吸收峰；同時半乳糖醛酸在硫酸溶液中與咔唑進行縮合反應生成紫紅色物
質，該有色物質在 530nm 處有特征吸收峰。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值計算得到果膠甲酯化
程度（PMD）。
所需的儀器和用品：
酶標儀、96 孔板、水浴鍋、可調式移液器、乙醇、濃硫酸、研缽。
試劑盒組成和配制：
提取液：液體 120mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 2mL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 12mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：液體μL×2 支，-20℃保存，用前輕甩幾下使液體落入底部，再加 0.56mL 試劑三混勻溶解，
分裝-20℃凍存，禁止反復凍融。
試劑五 A：液體μL×2 支，4℃保存；
試劑五 B：透明 8mL ×4 空瓶，臨用前吸取 7mL 的試劑六至一瓶試劑 B 中，再吸取 15μL 的試劑 A
至試劑 B 中，混勻溶解做為試劑五備用。
試劑六：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；
試劑七：液體 3mL×1 支，4℃保存；
果膠甲酯化程度(PMD)檢測：
一、樣本制備：
1、 取 0.1g 組織樣本，加 1mL 的 80%乙醇，研磨勻漿，轉移至 EP 管中，靜置 10 分鐘后于 4°C
下 8000rpm 離心 10min，棄上清留沉淀。
2、 向沉淀中加入 1mL 的 80%乙醇，混勻，靜置 10 分鐘后于 4°C 下 8000rpm 離心 10 min，
棄上清留沉淀。
3、 再向沉淀中加入 1 mL 提取液，混勻，沸水浴 1 小時，流水冷卻至室溫，8000rpm，4℃離心 10min，
棄沉淀，取上清液即樣本待測。
檢測步驟：
一、待檢液制備
二、甲醇生成量測定：
1、 打開酶標儀，調節(jié)波長至 412nm；
2、 在 EP 管中依次加入：
2、 在 EP 管中依次加入：
掃描二維碼
掃描二維碼
資料/datasheet
