植物總酚(Total Phenols,TP)試劑盒說(shuō)明書
微量法100T/48S
注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
植物酚類物質(zhì)具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
測(cè)定原理:
在堿性條件下,酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原,產(chǎn)生藍(lán)色化合物,在760nm處有特征吸收峰,測(cè)760nm處的吸光值,即可得樣品總酚含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:60%乙醇,自備。
試劑一:液體3mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體5mL×1瓶,4℃保存。
總酚提?。?/p>
直接檢測(cè)
測(cè)定操作表:
對(duì)照管
測(cè)定管
樣本待測(cè)液(μL)
10
試劑一(μL)
50
混勻,25℃靜置2min
試劑二(μL)
H2O(μL)
140
90
混勻,25℃靜置10 min,于微量石英比色皿/96孔板中,測(cè)定760nm吸光值,ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。
總酚含量計(jì)算公式:
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 2.808x+0.0012,R2 = 0.9994
總酚含量(mg/g 干重)=(ΔA-0.0012 )÷2.808
= 0.356×(ΔA–0.0012 )
注意事項(xiàng):
1. 吸光值大于2,樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定,注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。
2. 試劑一對(duì)皮膚有一定的刺激性,請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施。
3. 最低檢出限為2.4 μg/g。
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客服-林燕