血清低密度脂蛋白（Low density lipoprotein cholesterol , LDL-C）試劑盒說明書
微量法 100管/96樣
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
低密度脂蛋白為血清蛋白之一，主要由肝臟合成，與冠心病的發(fā)生和動脈粥樣硬化損傷呈正相關(guān)，是脂類疾病分類和風險預測的一個重要指標。
測定原理
用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白膽固醇，利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸，從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC；進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-膽甾烯酮和H2O2；再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類化合物；在500nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品
離心機，恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體15mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存。臨用前加5mL試劑四充分溶解。
試劑四：液體10mL×1瓶，4℃保存。
標準品：液體1mL×1支，4℃保存。
樣品處理
取血后3小時內(nèi)分離血清，將血清樣品與試劑一按照2:1的比例充分混勻，25℃靜置15min，2000g離心15min，上清置于冰上待測。
測定操作表
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空白管 |
標準管 |
測定管 |
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蒸餾水（μL） |
4 |
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標準品（μL） |
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4 |
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樣本（μL） |
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4 |
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試劑二（μL） |
150 |
150 |
150 |
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試劑三（μL） |
50 |
50 |
50 |
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混勻，37℃靜置30min，于1mL玻璃比色皿，空白管調(diào)零，測定500nm處吸光值A(chǔ)。分別記為A標準管和A測定管 |
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計算公式
LDL-C含量（mmol/L）= A測定管÷A標準管×C標準管
=5×A測定管÷A標準管
C標準管：5mmol/L
b．用96孔板測定的計算公式如下
LDL-C含量（mmol/L）= A測定管÷A標準管×C標準管
=5×A測定管÷A標準管
C標準管：5mmol/L
注意事項
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資料/datasheet
