直鏈淀粉含量試劑盒說明書
微量法 100管/96樣
正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
直鏈淀粉是D-葡萄糖基以a-(1,4)糖苷鍵連接的多糖鏈，其含量測定對于評價食品營養(yǎng)價值和調查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。
測定原理：
利用80％乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開，直鏈淀粉與碘形成的絡合物在620nm下有吸收峰。
需自備的儀器和用品：
酶標儀/可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰、乙醚和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一：液體100mL×1瓶；4℃保存；
試劑二：乙醚100mL×1瓶；(自備)
試劑三：液體100mL×1瓶；4℃保存；
試劑四：液體2mL×1瓶；4℃保存；
試劑五：液體300uL×1瓶；4℃保存；
淀粉提?。?nbsp;
稱取0.01~0.02g烘干樣本（建議稱取約0.01g）于研缽中研碎，加入1mL試劑一，充分勻漿后轉移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入1mL試劑二（乙醚）振蕩5min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入1mL試劑三充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后待測。
測定步驟：
測定管：在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μL樣本， 14μL試劑四，120μL蒸餾水，2μL試劑五，44uL蒸餾水，混勻，測定620nm處吸光值，記為A測定。
空白管：在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μL試劑三， 14μL試劑四，120μL蒸餾水，2μL試劑五，44μL蒸餾水，混勻，測定620nm處吸光值，記為A空白。
直鏈淀粉含量計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y=1.755x+0.0062；x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。
1、按照蛋白濃度計算
直鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(A測定-A空白-0.0062)×V1]÷1.755 ÷(V1×Cpr)=0.57×(A測定-A空白-0.0062) ÷Cpr
2、按樣本干重計算
直鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(A測定-A空白-0.0062)×V1] ÷1.755÷(W×V1÷V2) =0.57×(A測定-A空白-0.0062) ÷W
V1：加入反應體系中樣本體積，0.02mL；V2：加入提取液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y= 0.8775x+0.0062；x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。
1、按照蛋白濃度計算
直鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(A測定-A空白-0.0062)×V1]÷0.8775 ÷(V1×Cpr)=1.14×(A測定-A空白-0.0062) ÷Cpr
2、按樣本干重計算
直鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(A測定-A空白-0.0062)×V1] ÷0.8775/(W×V1÷V2) =1.14×(A測定-A空白-0.0062) ÷W
V1：加入反應體系中樣本體積，0.02mL；V2：加入提取液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g
最低檢測限為1mg/g干重或10μg/mgprot。
掃描二維碼
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資料/datasheet
