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植酸含量測(cè)試盒(比色法)
AS6321356
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產(chǎn)品詳情

植酸(Saponin )含量試劑盒說(shuō)明書(shū)

                                微量法 100管/96樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:

植酸又稱肌酸、環(huán)己六醇六全-二氫磷酸鹽,它主要存在于植物的種子、根干和莖中,其中以豆科植物的種子、谷物的麩皮和胚芽中含量最高。植酸作為螯合劑、抗氧化劑、保鮮劑、水的軟化劑、發(fā)酵促進(jìn)劑、金屬防腐蝕劑等,廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、油漆涂料、日用化工、金屬加工、紡織工業(yè)、塑料工業(yè)及高分子工業(yè)等行業(yè)領(lǐng)域。

測(cè)定原理:

磺基水楊酸-氯化鐵溶液顯紫紅色,在500nm下有最大吸光值。在pH6.0-6.5的環(huán)境下,植酸和鐵離子結(jié)合使溶液顏色變淡,測(cè)定吸光度的降低來(lái)檢測(cè)植酸含量。

所需的儀器和用品:

酶標(biāo)儀、烘箱、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、金屬震蕩儀、蒸餾水

試劑的組成和配制:

試劑一:100ml×1瓶,4℃保存;

試劑二:50mL×1瓶,4℃保存;

試劑三:100mL×1瓶,4℃保存;

試劑四:6mL×1瓶,4℃保存。

植酸提?。?/p>

樣本烘干,粉碎過(guò)篩,稱取0.05g,加入1mL試劑一,震蕩提取2h;8000g,25℃離心10min,取上清0.5mL,加入0.5mL試劑二,混勻后4℃靜置2h,離心取上清待測(cè)。

測(cè)定步驟

1、酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至500nm。

2、測(cè)定管:取100μL上清,加入900μL試劑三,混勻后取150μL加入96孔板,再加入50μL試劑四,充分混勻后500nm下測(cè)定吸光值A(chǔ)1。

3、空白管:取100μL蒸餾水,加入900μL試劑三,混勻后取150μL加入96孔板,再加入50μL試劑四,充分混勻后500nm下測(cè)定吸光值A(chǔ)2。計(jì)算ΔA=A2-A1。

空白管只要做一管。

植酸含量計(jì)算:

標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線為:y = 2.0284x + 0.0096,R2 = 0.993;X為植酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y為吸光值ΔA(A2-A1)。

植酸含量(mg/g干重)=(ΔA-0.0096)÷ 2.0284×V反總÷V樣÷(W÷V樣總)

                        =9.86×(ΔA-0.0096)÷W

V反總:測(cè)定液總體積,1mL;V樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.1mL; V樣總:加入提取液總體積,2mL;W:樣本干重,g。

注意事項(xiàng):

若ΔA高于0.2,說(shuō)明樣本植酸濃度過(guò)高,需要加蒸餾水適當(dāng)稀釋,并在計(jì)算結(jié)果中乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)

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