三年片观看免费观看大全,成人午夜视频精品一区,一二三四日本高清社区5,日本又色又爽又黄的A片18禁,狂躁女人双腿流白色液体

您好，歡迎來到上海撫生實(shí)業(yè)有限公司！
400-990-7709 / 021-52961052（工作日9:00-18:00）
  1. 首頁(yè)
  2. 產(chǎn)品中心
  3. 生化試劑盒
  4. 三羧酸循環(huán)系列
α酮戊二酸脫氫酶（αKGDH）測(cè)試盒（比色法）
AS6321140
貨號(hào) 純度 規(guī)格 目錄價(jià) 會(huì)員價(jià) 庫(kù)存 數(shù)量 購(gòu)買
AS6321140-100管/96樣 100管/96樣 ￥1400.00 登錄查看
AS6321140-50管/48樣 50管/48樣 ￥720.00 登錄查看
產(chǎn)品詳情

α-酮戊二酸脫氫酶（α-KGDH）活性測(cè)定試劑盒說明書

                                        微量法 100管/96樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義

α-KGDH（EC 1.2.4.2）廣泛存在于動(dòng)物、植物微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是三羧酸循環(huán)調(diào)控關(guān)鍵酶之一，催化α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰輔酶A。

測(cè)定原理

α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和輔酶A生成琥珀酰輔酶A、 二氧化碳和 NADH，NADH在340 nm有特征吸收峰，以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制

試劑一：100mL×1瓶，-20℃保存；

試劑二：20mL×1瓶，-20℃保存；

試劑三：1.5mL×1支，-20℃保存；

試劑四：液體20mL×1瓶，4℃保存；

試劑五：粉劑×1瓶，-20℃保存；

試劑六：粉劑×1支，-20℃保存；

樣本的前處理：

組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：

  1. 稱取約0.1g組織或收集500萬細(xì)胞，加入1mL試劑一和10uL 試劑三，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
  2. 將勻漿600g，4℃離心5min。
  3. 棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，11000g，4℃離心10min。
  4. 上清液即胞漿提取物，可用于測(cè)定從線粒體泄漏的α-KGDH（此步可選做）。
  5. 在步驟④的沉淀中加入200uL試劑二和2uL 試劑三，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），用于線粒體α-KGDH活性測(cè)定。

測(cè)定步驟

  1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
  2. 樣本測(cè)定

（1）在試劑五中加入18mL試劑四充分溶解，置于37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）水浴10min；現(xiàn)配現(xiàn)用；

（2）在試劑六中加入1mL蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；

（3）在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本、10μL試劑六和180μL試劑五，混勻，立即記錄340nm處20s時(shí)的吸光值A(chǔ)1和 2min20s后的吸光值A(chǔ)2，計(jì)算ΔA=A2-A1。

 

 

 

 

α-KGDH活性計(jì)算

（1） 按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。

 α-KGDH活性（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=1608×ΔA÷Cpr

（2） 按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。

 α-KGDH（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=325×ΔA÷W

（3） 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。

α-KGDH活性（nmol/min/104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.65×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.01 mL；V樣總：加入提取液體積，0.202 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬。

b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

（1） 按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活性單位。

α-KGDH活性（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=3216×ΔA÷Cpr

（2） 按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活性單位。

α-KGDH活性（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=650×ΔA÷W

（3） 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活性單位。

α-KGDH活性（nmol/min/104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=1.3×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：96孔板光徑，0.5cm；V樣：加入樣本體積，0.01 mL；V樣總：加入提取液體積，0.202 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬。

 

相關(guān)產(chǎn)品
順烏頭酸酶(ACO)測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321153 規(guī)格：100管/96樣
羥甲基戊二酰輔酶A合成酶（HMGCS）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321152 規(guī)格：100管/96樣
甲基檸檬酸合酶(MCS）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321151 規(guī)格：100管/96樣
乳酸含量（LA）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321149 規(guī)格：100管/48樣
線粒體蘋果酸脫氫酶（MDHm）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321148 規(guī)格：100管/96樣
線粒體檸檬酸(MCA）含量測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321147 規(guī)格：100管/96樣
乙酰輔酶A測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321146 規(guī)格：100管/96樣
線粒體異檸檬酸脫氫酶（ICDHm)測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321144 規(guī)格：100管/96樣
丙酮酸脫氫酶（PDH)測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321143 規(guī)格：100管/96樣
琥珀酸脫氫酶（SDH)測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321142 規(guī)格：100管/96樣
檸檬酸（CA）含量測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321141 規(guī)格：100管/96樣
α酮戊二酸脫氫酶（αKGDH）測(cè)試盒（比色法）
產(chǎn)品編號(hào)：AS6321140 規(guī)格：100管/96樣